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发表于 2006-10-25 13:02
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叠链和插入反平行的β－折叠链之间的4个环组成。四个环组成病毒衣壳表面的大部分， 8 K0 D2 a9 f# b# n
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环3和4构成围绕三倍体对称轴突起的整个结构。 V) q$ D3 q/ D3 p
, Y# q! I, g% T; u4 ^! D; o§1．3．3 CPV-2的衣壳结构 , o: f% I- R6 T/ ^) Y
0 s, H$ K/ i4 }9 N, T. [CPV-2的病毒粒子为T：I的二十面体对称结构。病毒无囊膜。在电镜下呈圆形或六
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2 O1 n' v6 `# [3 \2 @角型。直径约25nm，衣壳由32个长约3～4nm的壳粒组成。CPV一2和FPV所有生物学上 ) }7 U( d8 ?' t% j8 K2 \
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的不同都是由病毒衣壳蛋白和结构决定的，完整CPV一2的衣壳结构(包含DNA)或空CPV-2 % s. G* w+ F* j5 B: |) n1 L
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的衣壳结构通过x一射线结晶学已经被测定。在病毒的衣壳表面有大量的显著特征［31］：① - V! {# v N; q3 S+ T/ R2 K
i- w/ `$ r2 } G3 `( K3 z m在每个三倍体对称轴上有一个突起(Spike)长2．2nm，直径7nm。②在每个五倍体对称 # _# {. Y; D9 {- q; X, H3 \
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轴上形成一个圆桶型结构，由五对反平行的B链组成，每个反平行的0链之间由氢键
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* t8 j% a, m" i2 y p- ^连接。圆桶型结构的内部直径分别为，在病毒半径11．3nm处是1．4nm，在病毒半径12．7nm & d6 s' P [( t- w; z a" m
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处是2．2nm。③在两个三倍体突起之间，二倍体对称轴上有一条凹陷(Dimple)，深1．5nm。 . M9 p0 _) t. x
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④在每个五倍体对称轴上的桶型结构外边环绕着一条峡谷(Canyon)，宽1．1nm，峡谷底
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9 j. X% F/ m9 ]4 I9 u4 |: {部距桶型结构的顶点是O．9nm，高1．5nm的嵴从二倍体对称轴处将峡谷分开。病毒的半
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径在三倍体轴处是14nm，沿着五倍体轴是13．2nm，沿着二倍体轴是11．2nm，在峡谷底
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部半径是11．7nm。 1 m( P" j, D, i1 e4 G, j
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§1．3．4 CPV～2的衣壳结构功能区 , a6 ]7 x' ~, ^+ ]1 w2 {- O U
$ c i1 U, G6 k# C& W通过对编码结构蛋白的深入研究，诸如采用基因缺失、重组图谱、编译框移位、确
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定的位点诱变、蛋白氨基酸序列的对比分析、并结合免疫化学分析手段，明确了CPV-2 / F! `4 I# k6 K7 o6 T7 x8 P' R* S7 |
0 u" ?1 a2 c/ Y3 |$ e1 k9 n编码蛋白的一些功能。 + n( i/ L* y1 w0 X
: N6 t1 g4 [. E' W7 Tl 3．4．1 CPV 2的抗原决定簇区
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CPV-2的抗原决定簇区主要分布于比较暴露的蛋白衣壳表面。根据肽图谱定位发现
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［12，14］抗原表位存在于三倍体突起、VP2的氨基端、凹陷内和五倍体对称轴附近，如抗原
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表位残基Ala300在病毒的最外边，即形成三倍体轴突起的一个环的顶部。残基Asn93
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也在三倍体轴突起的最外边。利用单克隆抗体显示［55］，两个主要的抗原区在病毒的三倍 $ n8 s0 p( d: m' a* r" F% G9 ~
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体突起上。一个区域在三倍体突起顶部的附近，第二个区域在残基300附近，即三倍体
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突起的肩部，但也有少数单抗和这两个部位无关，指示它们的抗原表位可能在其他部位。
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研究发现，在VP2亚基的N端和c端也有抗原区存在，因为对应VP2残基l一23的肽和 I4 g/ f4 y. x) S' Z. O5 l
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两个单抗反应。从以上事例可以看出，CPV一2至少有三个抗原表位区，①环l和环3
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附近的区域；②二倍体对称轴的下陷和三倍体对称轴突起之间的区域；③临近三倍体对
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称轴突起的中心区。
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§1．3．4．2 CPV一2的受体结合部位
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/ y' T3 q$ V1 Y5 a采用特异性抗体封闭以及结合精细的编码结构蛋白基因的缺失和重组体共转染易
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% ~# T) v* |. B) D& W# ]: I; j3 ~! L感细胞的研究，发现VPl、VP2蛋白在细小病毒感染过程中起着极为重要的作用。缺失
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VPl和VP2蛋白的突变体均丧失了对宿主细胞的再感染性。对CPV-2结构蛋白的分析及 % y: m$ |5 O; x: ~0 L5 g
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编码基因突变的研究，发现CPV 2衣壳蛋白某些区域，甚至几个残基对CPV一2侵染细胞
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7 p! D# W6 O6 q4 @& x! s第六页缺失 & r: E- T$ K0 K, W0 o
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5 r$ }8 X* |2 _1 h0 X退。最后因水、电解质平衡失调，并发酸中毒，常在腹泻后1～3天内死亡。体温升高
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9 F8 H6 t/ ]3 o( a. b到40～4l℃，但也有体温始终不高的。有的病犬腹泻可持续1周多。血液检查，白细胞 : T- {) E3 V' }/ @( g9 r
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总数明显减少，尤其是在发病的第5～6天最为明显，常在3000／mm3以下，血清总蛋白 2 w8 w9 P- |9 X
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量下降至4．2～6．6mg%，红细胞压容为45—7l，平均在50左右，转氨霉指数升高，发
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病率为20％～100％，死亡率为10％～50％。
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§2．3．2心肌炎型犬细小病毒病 @! [& O8 _3 x- `! |- I$ K2 ^7 [
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此型多见于4～6周龄的幼犬。发病的特别是临床症状未出现就突然死亡，或者出
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. E0 W6 z% o0 V) u; X9 `现严重的呼吸困难之后死亡。病程稍长的病理，发病初期精神尚好，或仅有轻度腹泻， ; [0 b6 N& x z& e1 e6 a. A5 P, t
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常突然病情加重，可视粘膜苍白，病犬迅速衰竭，呼吸极度困难，心区听诊有明显的心
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. h4 [7 P" o% s- }3 u) H3 u内杂音，常因急性心力衰竭而突然死亡。死亡率为60％～100％。
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; q% `/ X$ U2 P; b+ o* u§2．4病理变化
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0 a9 C3 K) o$ ]§2．4．1肠炎型 , h' ], D+ P- F
9 J- V9 \$ C6 i7 F6 ?小肠中段和后段肠腔扩张，浆膜下出血变为暗红色，肠系膜淋巴结肿胀、充血。有 / m0 ~& A& f1 A: i, x# s# T
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些病例，整个小肠表现充血和明显出血。组织学变化主要见于空肠、回肠，肠绒毛明显
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# h7 l4 w; Z4 |* j萎缩，肠腺消失，甚至粘膜严重剥脱，肝细局灶性坏死，少数动物干细胞和胆管上皮细 % ]7 l$ N) {" b1 H
7 j# m7 G) p8 F1 h胞中有嗜酸性核内包涵体。
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§2．4．2心肌炎型
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' b& W6 n# K) v* F肺水肿，由于局灶充血和出血，肺表面色彩斑驳。心脏扩张，两侧心房、心室有界
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限不明显的苍白区，心肌和心内膜有非化脓性坏死早，心肌纤维严重损伤，出现出血性 # g C5 q! n; K) b/ _, M" j; w
5 V" R- V: n* t I斑纹［13］。 $ k# e; u. `. W$ W4 r
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§2．5组织学检查
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2 ?+ h) M. `0 I0 x$ C取13例病死犬病料做石蜡切片，苏木素——伊红双色染色法，镜下可见：小肠和
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( b: P) \" W* Z大肠粘膜变性、坏死和脱落，毛细血管充血，绒毛萎缩，隐窝萎陷或扩张，肠上皮细胞 \3 q1 X9 w* `' M+ w# Y f
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内有核内包涵体。胃粘膜上皮变性、坏死和脱落，毛细血管充血。脾红，白髓界限不清，
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! V8 w; e0 K4 r. t皮窦、髓窦充血、出血，生发中心萎缩、消失。肝脂肪变性、颗粒变性，肝细胞核浓缩、 3 ]/ q- Q/ G. }, @) K
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碎裂及崩解。肾毛细血管尤其是髓质毛细血管充血，肾小管上皮细胞颗粒变性，肾小管
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腔有管型存在。在13例中，有5例心肌炎型的病犬，心肌肥厚，心包积液，肺叶边缘 ( a3 x* G$ l2 \% V
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有瘀血，肝肿大，其它组织病变不十分明显。做心肌石蜡切片，可见心脏纤维颗粒变性
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间质毛细血管偶见充血，有的心肌或心内膜有非化脓性坏死灶，常见出血性斑纹，心
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; r) h' f$ L4 `肌损伤部位的细胞内可见核内包涵体。
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& E' N5 n* _6 c& e# [; W- c§2．6鉴别诊断
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4 ?& Y1 t1 r& a. U6 e* ]应注意与犬瘟热，传染性肝炎、冠状病毒病及菌痢相鉴别。鉴别诊断应注意与犬 1 `7 B- S% z. x Y+ s
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瘟热，传染性肝炎、冠状病毒病及菌痢相鉴别
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§2．6．1犬瘟热 6 {! G7 H; `% {$ ^- }8 K+ i" t
' `1 ?( t. L/ X& F5 M以双相体温升高，白细胞减少，急性鼻卡他以及随后的支气管炎他肺炎、严重的胃
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4 d6 ~3 z& S9 ^+ e% }. @2 F肠炎和神经症状为特征。而犬细小病毒病则惧呕吐、腹泻、血便、迅速脱水为主。
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, `& v# j+ t. k4 j0 a§2．6．2传染性肝炎 - f( U. e, ~) s( t( m' }$ ?
; B/ Q- \# r4 z6 J“马鞍”型体温曲线，呕吐、腹泻、牙龈出血、剑状软骨部位出现腹痛，出血时间 , S* s: d0 z0 {" r5 ^
, _. z5 T$ p, `# ~ w6 e0 n- K/ @延长，急性疾状消失后一眼或双眼暂时性角膜混浊，渴欲增高。
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- A, h; p* n, D- h# ]# j§2．6．3冠状病毒病
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l临床上，主要表现为胃肠为症状，确诊应借助于电镜，鉴别病毒，如CCV、CPV、ISIIV。
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§2．6．4菌痢
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+ o; i9 \# m: v( h G: B以沙门氏菌、痢疾杆菌、致死性大肠杆菌、空肠弯曲菌感染为主的肠炎。以脓冻样 3 z6 I7 |2 x0 ?9 A& H
# ^( Y4 w, ^. M" t稀便多见，一般出现血便，抗生素治疗效果明显，而细小病毒引起的犬腹泻，潜血反应
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为阳性，抗生素治疗无效。
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§2．7免疫预防
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自1982年以来，国内一些警犬、军犬部门及科研单位，曾先后从美国、西德引进 $ x2 X. p, q* W. R4 ~ a, B8 b2 m- M/ M
_1 g7 r2 S9 ZCPV灭活菌、弱毒苗及猫泛白细胞减少症疫苗等用于预防CPV病，但效果均不理想，不
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1 z$ ?# E' G7 m" ?1 y7 T能控制本病德发生和流行。而近年来应用解放军兽医大学军事兽研所研制的CPV弱毒疫 2 ~" Q/ r. x8 S" C: k& b0 s" t
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苗和公安部南京警犬研究所研制的CPV—GNl灭活疫苗以来，能有效地预防本病的发生和 ( a% m7 _4 y- p8 d
5 {# p( c* U7 p6 P4 P流行，故在国内广泛应用。
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$ O- J4 b* ]$ B6 E§2．7．1免疫程序：
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国产CPV弱毒苗和CPV—GNl灭活苗对1．5～3月龄幼犬免疫二次(间隔两周)，每次肌
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肉或皮下注射，免疫期为1年．发生疫情时，可用本疫苗做紧急预防。pollock等研究指 0 c- `/ K" \: J2 W
- Z% P# V* N$ q+ z) j7 P出，血清H1效价超过1：80的犬即可抵抗CPV感染。在攻毒实验中发现CPV-GNl灭活
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苗二次免疫后，抗体效价超过1：80，攻毒后全部得到保护。从实验结果看，接种一次
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, T( T0 Y6 \ B* C' H, ^) G1 V: r疫苗后，犬血清效价很难都达到l：80以上，而在第二次免疫后，效价均有明显提高。
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因此，CPV-GNl灭活苗在临床应用时应间隔两周进行重复注苗。国产CPV弱毒苗也是如 - H: z! Y! `" U
. t& f+ N. J! c' M0 c: k此。在免疫过程中，要采用合理的免疫程序，除对幼犬免疫外，还应对怀孕中期的母犬 - C6 h8 y& O) L# _: a
j0 \9 q; E- n和其它成年犬进行免疫，不但可提高母源抗体水平，同时也可减少临床正常犬的排毒现
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象。 / Z. n) G2 C; J( x
* u) h4 L S0 r. i2 P/ |8 f§2．7．2免疫效果：
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叶俊华［16］等通过对国产CPV弱毒疫苗和从美国引进的CPV弱毒苗“Parvoid”(系号： 9 d# e8 p9 M( z% B
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25053A)的对比实验(包括疫苗安全性试验，排毒与同居感染试验以及较大范围的田间 0 v' I4 t( e0 M3 H. Q+ ?$ z+ U
0 ^# M/ F+ j0 l% f7 _: y% T$ }0 |临床实际应用观察)，说明国产CPV弱毒苗安全可靠，其效果优于美国引进的CPV弱毒 8 E: w' k$ C2 l& x! A6 G" T5 i9 \
$ i* ^: ]- p9 v4 x9 b1 X2 \苗。在疫苗接种对照试验中，所有试验犬(30条)，注德国产CPV弱毒苗后，其它血凝 $ \: b4 w1 E2 l# J
& P! P% x. L0 I8 o; D; x9 I抑制抗体滴度均由阴性(1．8以下)上升达1：128以上，试验犬均能抵抗自然强毒感染， * M1 ]; X0 N% Y/ K' E- D1 U
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但在犬已潜伏感染CPV强毒时接种本疫苗则无治疗作用。用国产CPV弱毒苗共免疫1076 8 O# P9 Q4 ^0 L+ r: j1 M/ s# G* a
9 t6 O5 C) f2 U8 m条犬，结果有效1067条，保护率达99．12(发病9条犬中由6条时注苗前已有CPV感染
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' @- }7 w4 ^, K, {. e; ]症二紧急注苗的)。 8 G1 ]7 O) {/ }! O' d
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4 i2 _$ s/ K q5 A徐汉坤［12］等以分离南京病犬的犬细小病毒CPV—GNI毒株，研制成细小病毒细胞培养 D2 q4 G0 r; d; q( r( J
3 t& o$ E. }( ?% Y2 y6 [5 D
灭活疫苗用于免疫试验，发现CPV—GNI灭活苗免疫后无不良反应和排毒现象，安全可靠。 ' B$ n) j# U3 B9 }7 B) ~# Y( C
+ m8 G* Z1 [# v, H; M8 S" \一次免疫后，HI效价在1：40以上，二次免疫后多在1：80以上，口服攻击强毒后均无
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临床症状和排毒现象。20周后，免疫犬抗体水平仍在l：80以上。 |
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IP卡
狗仔卡
发表于 2006-10-25 13:01
提升卡
置顶卡
沉默卡
喧嚣卡
变色卡
千斤顶
显身卡
