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随着小动物饲养量的增加,犬眼病病例日益增多。根据我们的调查,犬眼病病例约占兽医外科临床病例的7.02%(215/3061),其中炎性眼表疾病占53%(114/215)。
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. I1 |' Q5 f! ~# z+ X 犬的眼表暴露于空气之中,与环境中的大量微生物相接触,因而正常菌群得以存在。当眼表的正常微生物环境或眼表的防御机制被破坏后,某些常在菌和病原菌大量孳生,引发眼表的炎症反应。这样就使得我们有必要了解哪些引发眼部感染的细菌为眼表常在菌。此外,了解犬眼表正常菌群的组成对眼表疾病的诊治和眼科手术前后的用药均有重要的指导意义。例如,在结膜囊内分离出的重要病原菌可提醒临床医生推迟眼科手术的施术时间,或根据药敏实验指导术前、术后的药物治疗。
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虽然人医对眼表细菌的研究报道甚多,但因人眼与犬眼解剖结构的差异和微环境的差异,使得人类与犬眼表常在菌不尽相同。对犬眼表正常菌群的调查研究,国外已有相关报道。但可能受到地域、季节、犬的生活环境以及采样方法等的影响,报道的结果也存在差异。故此,我们对北京地区犬眼表正常菌群进行了为期6个月的调查研究,并与国外相关报道的研究结果进行了比较。
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1.材料与方法
' G. L5 b) {; m! Y8 c/ B1.1 实验动物的选择 自2002年11月至2003年5月,我们对50只眼部临床健康犬进行了双眼采样。所选犬均为来中国农业大学动物医院进行免疫、体检、绝育及其它手术的眼部正常犬。实验动物采样前均未使用药物进行治疗,眼部呈临床健康状态。
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1.2 采样 眼睑及睑缘用75%的酒精消毒后,无需局麻,用长柄无菌棉拭子(购自生物梅里埃中国有限公司)在犬的下结膜囊涂擦数次。然后置于无菌试管,送至实验室。, }( j( r% p- }. z- S3 U
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1.3 细菌培养及鉴定 (1)培养基:5-6%绵羊血液培养基、普通培养基和麦康凯培养基。(2)细菌接种:采集的样本运至实验室后,用取材棉拭子涂布划线于绵羊血液培养基、普通培养基和麦康凯培养基上。然后置于35℃恒温箱中,培养24-48小时。(3)细菌鉴定:所得细菌根据平板上菌落特征和革兰氏染色进行初步鉴定,然后使用葡萄球菌编码管、肠杆菌编码管、非发酵菌编码管等(购自天津金章医用新技术研究所)进行鉴定。
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2.结果 经过为期6个月的调查研究,我们从50只犬的43眼分离出细菌63株,阳性率为43%。双侧眼阳性18例(36%),单侧眼阳性7例(14%),双侧眼阴性25例(50%)。所检出的细菌,革兰氏阳性球菌43株,约占68%;革兰氏阳性杆菌17株,约占27%;革兰氏阴性球菌2株,约占3%;革兰氏阳性杆菌1株,约占2%。其中最多的细菌分别为葡萄球菌(34株)、棒状杆菌(12株)、链球菌(6株)、微球菌(4株)。葡萄球菌中,凝固酶阳性菌多于凝固酶阴性菌;链球菌中,γ溶血型链球菌多于其它溶血型链球菌。(详细分类表略)
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3 |3 y* c) q' y; G- u6 q 常在菌中数量最多分别为葡萄球菌属、链球菌属、棒状杆菌属。虽然不同的研究结果中这三个菌属均为优势菌,但各菌属的比例有所差异。根据Gerding等(1988)、Stanz(1995)、Salisbury等(1995)和Peter-Jones(1997)报道的结果,葡萄球菌属和链球菌属是结膜炎、干性角膜结膜炎等眼表疾病的常见病原菌。由此可见,葡萄球菌属和链球菌属细菌均为条件致病菌。5 b4 X( ?3 V; Y0 [7 p8 ~6 ^
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) h% [; ~0 d% c7 h 随着环境的改变、多种抗生素在眼科的应用、以及细菌本身的生物学变迁,犬眼表正常微生物的分布可能会发生改变。本实验仅代表北京地区来中国农业大学动物医院门诊就诊部分犬的实验资料,其检出率仅有相对的代表性。要想全面了解犬结膜囊正常菌群的分布,应进行大范围多中心的调查。 |
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